സെൽ കൾച്ചർ മലിനീകരണം ഫലപ്രദമായി കുറച്ചു

സെൽ കൾച്ചറുകളുടെ മലിനീകരണം സെൽ കൾച്ചർ ലബോറട്ടറികളിലെ ഏറ്റവും സാധാരണമായ പ്രശ്നമായി മാറും, ചിലപ്പോൾ വളരെ ഗുരുതരമായ പ്രത്യാഘാതങ്ങൾ ഉണ്ടാക്കും.സെൽ കൾച്ചർ മാലിന്യങ്ങളെ രണ്ടായി തിരിക്കാം, രാസമാലിന്യങ്ങളായ മീഡിയം, സെറം, വാട്ടർ മാലിന്യങ്ങൾ, എൻഡോടോക്സിൻ, പ്ലാസ്റ്റിസൈസർ, ഡിറ്റർജന്റുകൾ, ബാക്ടീരിയ, പൂപ്പൽ, യീസ്റ്റ്, വൈറസുകൾ, മൈകോപ്ലാസ്മാസ് ക്രോസ് അണുബാധ തുടങ്ങിയ ജൈവമാലിന്യങ്ങൾ.മറ്റ് സെൽ ലൈനുകളാൽ മലിനമായത്.മലിനീകരണം പൂർണ്ണമായും ഇല്ലാതാക്കുക അസാധ്യമാണെങ്കിലും, അതിന്റെ ഉറവിടം നന്നായി മനസ്സിലാക്കുകയും നല്ല അസെപ്റ്റിക് ടെക്നിക്കുകൾ പിന്തുടരുകയും ചെയ്യുന്നതിലൂടെ അതിന്റെ ആവൃത്തിയും തീവ്രതയും കുറയ്ക്കാൻ കഴിയും.

1. ഈ വിഭാഗം ജൈവ മലിനീകരണത്തിന്റെ പ്രധാന തരങ്ങളെ വിവരിക്കുന്നു:
ബാക്ടീരിയ മലിനീകരണം
പൂപ്പൽ, വൈറസ് മലിനീകരണം
മൈകോപ്ലാസ്മ മലിനീകരണം
യീസ്റ്റ് മലിനീകരണം

1.1 ബാക്ടീരിയ മലിനീകരണം
സർവ്വവ്യാപിയായ ഏകകോശ സൂക്ഷ്മാണുക്കളുടെ ഒരു വലിയ കൂട്ടമാണ് ബാക്ടീരിയ.അവ സാധാരണയായി ഏതാനും മൈക്രോണുകൾ വ്യാസമുള്ളവയാണ്, ഗോളങ്ങൾ മുതൽ തണ്ടുകളും സർപ്പിളുകളും വരെ വിവിധ ആകൃതികളിൽ വരാം.അവയുടെ സർവ്വവ്യാപിത്വം, വലിപ്പം, ദ്രുതഗതിയിലുള്ള വളർച്ചാ നിരക്ക് എന്നിവ കാരണം, യീസ്റ്റ്, പൂപ്പൽ എന്നിവയ്‌ക്കൊപ്പം ബാക്ടീരിയകളും കോശ സംസ്‌കാരത്തിലെ ഏറ്റവും സാധാരണമായ ജൈവമാലിന്യങ്ങളാണ്.

1.1.1 ബാക്ടീരിയ മലിനീകരണം കണ്ടെത്തൽ
അണുബാധയേറ്റ് ഏതാനും ദിവസങ്ങൾക്കുള്ളിൽ സംസ്കാരത്തിന്റെ ദൃശ്യ പരിശോധനയിലൂടെ ബാക്ടീരിയ മലിനീകരണം എളുപ്പത്തിൽ കണ്ടെത്താനാകും;
രോഗബാധിതമായ സംസ്കാരങ്ങൾ സാധാരണയായി മേഘാവൃതമായി (അതായത്, പ്രക്ഷുബ്ധമായി) കാണപ്പെടുന്നു, ചിലപ്പോൾ ഉപരിതലത്തിൽ ഒരു നേർത്ത ഫിലിം ഉണ്ടാകും.
കൾച്ചർ മീഡിയത്തിന്റെ pH-ൽ പെട്ടെന്നുള്ള ഇടിവ് ഇടയ്ക്കിടെ നേരിടാറുണ്ട്.
ഒരു ലോ-പവർ മൈക്രോസ്കോപ്പിന് കീഴിൽ, ബാക്ടീരിയകൾ കോശങ്ങൾക്കിടയിൽ ചലിക്കുന്ന തരികൾ പോലെ കാണപ്പെടുന്നു, കൂടാതെ ഉയർന്ന പവർ മൈക്രോസ്കോപ്പിന് കീഴിലുള്ള നിരീക്ഷണം വ്യക്തിഗത ബാക്ടീരിയകളുടെ രൂപങ്ങൾ പരിഹരിക്കും.

1.2 പൂപ്പൽ & വൈറസ് മലിനീകരണം
1.2.1 പൂപ്പൽ മലിനീകരണം
പൂപ്പൽ ഫംഗസ് രാജ്യത്തിലെ യൂക്കറിയോട്ടിക് സൂക്ഷ്മാണുക്കളാണ്, അവ ഹൈഫേ എന്നറിയപ്പെടുന്ന മൾട്ടിസെല്ലുലാർ ഫിലമെന്റുകളുടെ രൂപത്തിൽ വളരുന്നു.ഈ മൾട്ടിസെല്ലുലാർ ഫിലമെന്റുകളുടെ കണക്റ്റീവ് നെറ്റ്‌വർക്കുകളിൽ കോളനികൾ അല്ലെങ്കിൽ മൈസീലിയം എന്ന് വിളിക്കപ്പെടുന്ന ജനിതകപരമായി സമാനമായ ന്യൂക്ലിയുകൾ അടങ്ങിയിരിക്കുന്നു.

യീസ്റ്റ് മലിനീകരണത്തിന് സമാനമായി, മലിനീകരണത്തിന്റെ പ്രാരംഭ ഘട്ടത്തിൽ സംസ്കാരത്തിന്റെ pH സ്ഥിരമായി തുടരുകയും, സംസ്കാരം കൂടുതൽ ഗുരുതരമായി ബാധിക്കുകയും മേഘാവൃതമാകുകയും ചെയ്യുന്നതിനാൽ അതിവേഗം വർദ്ധിക്കുന്നു.മൈക്രോസ്കോപ്പിന് കീഴിൽ, മൈസീലിയം സാധാരണയായി ഫിലമെന്റസ് ആണ്, ചിലപ്പോൾ ബീജങ്ങളുടെ ഇടതൂർന്ന ക്ലസ്റ്ററുകളായി.പല പൂപ്പലുകളുടെയും ബീജങ്ങൾക്ക് അവയുടെ പ്രവർത്തനരഹിതമായ ഘട്ടത്തിൽ വളരെ കഠിനവും വാസയോഗ്യമല്ലാത്തതുമായ ചുറ്റുപാടുകളിൽ അതിജീവിക്കാൻ കഴിയും, ശരിയായ വളർച്ചാ സാഹചര്യങ്ങൾ നേരിടുമ്പോൾ മാത്രമേ അത് സജീവമാകൂ.

1.2.2 വൈറസ് മലിനീകരണം
പുനരുൽപാദനത്തിനായി ആതിഥേയ കോശത്തിന്റെ യന്ത്രസാമഗ്രികൾ ഏറ്റെടുക്കുന്ന മൈക്രോസ്കോപ്പിക് ഇൻഫെക്ഷ്യസ് ഏജന്റുകളാണ് വൈറസുകൾ.അവയുടെ വളരെ ചെറിയ വലിപ്പം അവയെ സംസ്‌കാരത്തിൽ കണ്ടുപിടിക്കാനും സെൽ കൾച്ചർ ലബോറട്ടറികളിൽ ഉപയോഗിക്കുന്ന റിയാക്ടറുകളിൽ നിന്ന് നീക്കം ചെയ്യാനും ബുദ്ധിമുട്ടാക്കുന്നു.മിക്ക വൈറസുകൾക്കും അവയുടെ ആതിഥേയർക്ക് വളരെ കർശനമായ ആവശ്യകതകൾ ഉള്ളതിനാൽ, അവ സാധാരണയായി ഹോസ്റ്റ് ഒഴികെയുള്ള ജീവജാലങ്ങളുടെ കോശ സംസ്കാരങ്ങളെ പ്രതികൂലമായി ബാധിക്കില്ല.
എന്നിരുന്നാലും, വൈറസ് ബാധിച്ച സെൽ കൾച്ചറുകളുടെ ഉപയോഗം ലബോറട്ടറി ജീവനക്കാരുടെ ആരോഗ്യത്തിന് ഗുരുതരമായ അപകടമുണ്ടാക്കും, പ്രത്യേകിച്ചും മനുഷ്യ അല്ലെങ്കിൽ പ്രൈമേറ്റ് കോശങ്ങൾ ലബോറട്ടറിയിൽ വളർന്നിട്ടുണ്ടെങ്കിൽ.

സെൽ കൾച്ചറുകളിലെ വൈറൽ അണുബാധ ഇലക്‌ട്രോൺ മൈക്രോസ്കോപ്പി, ഒരു കൂട്ടം ആന്റിബോഡികൾ ഉപയോഗിച്ച് ഇമ്മ്യൂണോസ്റ്റൈനിംഗ്, ELISA അല്ലെങ്കിൽ ഉചിതമായ വൈറൽ പ്രൈമറുകൾ ഉപയോഗിച്ച് PCR എന്നിവയിലൂടെ കണ്ടെത്താനാകും.

1.3 മൈകോപ്ലാസ്മ മലിനീകരണം
കോശഭിത്തികളില്ലാത്ത ലളിതമായ ബാക്ടീരിയയാണ് മൈകോപ്ലാസ്മ, അവ സ്വയം പകർത്തുന്ന ഏറ്റവും ചെറിയ ജീവികളാണെന്ന് കരുതപ്പെടുന്നു.അവയുടെ വളരെ ചെറിയ വലിപ്പം (സാധാരണയായി 1 മൈക്രോണിൽ താഴെ) കാരണം, വളരെ ഉയർന്ന സാന്ദ്രതയിൽ എത്തുന്നതുവരെ മൈകോപ്ലാസ്മ കണ്ടുപിടിക്കാൻ പ്രയാസമാണ്;അതുവരെ, സാധാരണയായി അണുബാധയുടെ വ്യക്തമായ സൂചനകളൊന്നുമില്ല.

1.3.1 മൈകോപ്ലാസ്മ മലിനീകരണം കണ്ടെത്തൽ
സാവധാനത്തിൽ വളരുന്ന ചില മൈകോപ്ലാസ്മകൾ കോശങ്ങളുടെ മരണത്തിന് കാരണമാകാതെ സംസ്‌കാരങ്ങളിൽ നിലനിന്നേക്കാം, എന്നാൽ അവ സംസ്‌കാരങ്ങളിലെ ആതിഥേയ കോശങ്ങളുടെ സ്വഭാവത്തെയും രാസവിനിമയത്തെയും മാറ്റുന്നു.

വിട്ടുമാറാത്ത മൈകോപ്ലാസ്മ അണുബാധയുടെ സവിശേഷത കോശങ്ങളുടെ വ്യാപന നിരക്ക് കുറയുകയും സാച്ചുറേഷൻ സാന്ദ്രത കുറയുകയും സസ്പെൻഷൻ കൾച്ചറിലെ സങ്കലനം കുറയുകയും ചെയ്യും.
എന്നിരുന്നാലും, മൈകോപ്ലാസ്മ മലിനീകരണം കണ്ടെത്തുന്നതിനുള്ള ഏക വിശ്വസനീയമായ മാർഗ്ഗം ഫ്ലൂറസെന്റ് സ്റ്റെയിനിംഗ് (ഉദാഹരണത്തിന്, ഹോച്ച്സ്റ്റ് 33258), ELISA, PCR, ഇമ്മ്യൂണോസ്റ്റൈനിംഗ്, ഓട്ടോറേഡിയോഗ്രാഫി അല്ലെങ്കിൽ മൈക്രോബയൽ ടെസ്റ്റിംഗ് എന്നിവ ഉപയോഗിച്ച് പതിവായി സംസ്കാരം പരിശോധിക്കുക എന്നതാണ്.

1.4 യീസ്റ്റ് മലിനീകരണം
ഏതാനും മൈക്രോൺ (സാധാരണയായി) മുതൽ 40 മൈക്രോൺ (അപൂർവ്വമായി) വരെ വലിപ്പമുള്ള, ഫംഗസ് രാജ്യത്തിലെ ഏകകോശ യൂക്കറിയോട്ടുകളാണ് യീസ്റ്റ്.

1.4.1യീസ്റ്റ് മലിനീകരണം കണ്ടെത്തൽ
ബാക്ടീരിയൽ മലിനീകരണം പോലെ, യീസ്റ്റ് കൊണ്ട് മലിനമായ സംസ്കാരങ്ങൾ മേഘാവൃതമാകും, പ്രത്യേകിച്ച് മലിനീകരണം വിപുലമായ ഘട്ടത്തിലാണെങ്കിൽ.യീസ്റ്റ് കലർന്ന സംസ്‌കാരങ്ങളുടെ pH, മലിനീകരണം കൂടുതൽ രൂക്ഷമാകുന്നതുവരെ വളരെ കുറച്ച് മാത്രമേ മാറുകയുള്ളൂ, ആ ഘട്ടത്തിൽ pH സാധാരണയായി വർദ്ധിക്കും.മൈക്രോസ്കോപ്പിന് കീഴിൽ, യീസ്റ്റ് വ്യക്തിഗത അണ്ഡാകാരമോ ഗോളാകൃതിയിലുള്ളതോ ആയ കണങ്ങളായി പ്രത്യക്ഷപ്പെടുകയും ചെറിയ കണങ്ങൾ ഉൽപ്പാദിപ്പിക്കുകയും ചെയ്യും.

2.ക്രോസ് അണുബാധ
സൂക്ഷ്മജീവികളുടെ മലിനീകരണം പോലെ സാധാരണമല്ലെങ്കിലും, ഹെലയും മറ്റ് അതിവേഗം വളരുന്ന സെൽ ലൈനുകളും ഉപയോഗിച്ച് പല സെൽ ലൈനുകളുടെയും വിപുലമായ ക്രോസ്-മലിനീകരണം ഗുരുതരമായ പ്രത്യാഘാതങ്ങളുള്ള വ്യക്തമായി നിർവചിക്കപ്പെട്ട പ്രശ്നമാണ്.പ്രശസ്തമായ സെൽ ബാങ്കുകളിൽ നിന്ന് സെൽ ലൈനുകൾ നേടുക, സെൽ ലൈനുകളുടെ സവിശേഷതകൾ പതിവായി പരിശോധിക്കുക, നല്ല അസെപ്റ്റിക് ടെക്നിക്കുകൾ ഉപയോഗിക്കുക.ക്രോസ്-മലിനീകരണം ഒഴിവാക്കാൻ ഈ രീതികൾ നിങ്ങളെ സഹായിക്കും.ഡിഎൻഎ വിരലടയാളം, കാരിയോടൈപ്പിംഗ്, ഐസോടൈപ്പിംഗ് എന്നിവയ്ക്ക് നിങ്ങളുടെ സെൽ കൾച്ചറിൽ ക്രോസ്-മലിനീകരണമുണ്ടോ എന്ന് സ്ഥിരീകരിക്കാൻ കഴിയും.

സൂക്ഷ്മജീവികളുടെ മലിനീകരണം പോലെ സാധാരണമല്ലെങ്കിലും, ഹെലയും മറ്റ് അതിവേഗം വളരുന്ന സെൽ ലൈനുകളും ഉപയോഗിച്ച് പല സെൽ ലൈനുകളുടെയും വിപുലമായ ക്രോസ്-മലിനീകരണം ഗുരുതരമായ പ്രത്യാഘാതങ്ങളുള്ള വ്യക്തമായി നിർവചിക്കപ്പെട്ട പ്രശ്നമാണ്.പ്രശസ്തമായ സെൽ ബാങ്കുകളിൽ നിന്ന് സെൽ ലൈനുകൾ നേടുക, സെൽ ലൈനുകളുടെ സവിശേഷതകൾ പതിവായി പരിശോധിക്കുക, നല്ല അസെപ്റ്റിക് ടെക്നിക്കുകൾ ഉപയോഗിക്കുക.ക്രോസ്-മലിനീകരണം ഒഴിവാക്കാൻ ഈ രീതികൾ നിങ്ങളെ സഹായിക്കും.ഡിഎൻഎ വിരലടയാളം, കാരിയോടൈപ്പിംഗ്, ഐസോടൈപ്പിംഗ് എന്നിവയ്ക്ക് നിങ്ങളുടെ സെൽ കൾച്ചറിൽ ക്രോസ്-മലിനീകരണമുണ്ടോ എന്ന് സ്ഥിരീകരിക്കാൻ കഴിയും.